近日,第三軍醫大學新橋醫院口腔科研究人員發表論文,旨在探討miR-519家族對人牙周膜細胞內MMP-2表達的影響。研究指出,miR-519家族可負性調控人牙周膜細胞內MMP-2基因的表達。該文發表在2014年第03期《現代口腔醫學雜志》上。
構建MMP-2雙熒光素酶野生型和突變型表達載體,應用TargetScan和miRanda等軟件預測作用於MMP-23'-UTR靶向miRNA,利用雙熒光素酶報告基因檢測系統驗證靶向MMP-23'-非翻譯區(3'-UTR)的miRNA。用qRT-PCR和Westernblot技術檢測miR-519家族對MMP-2表達的調控。 軟件預測在MMP-2的3'-UTR位置有一個與miR-519家族的結合位點;mimics-miR-519實驗組與轉染controlmiR組和突變型載體組相比,能明顯降低MMP-2載體的熒光素酶活性(P<0.05)。qRT-PCR結果顯示實驗組的miR-519較對照組表達顯著增高(P<0.01)。qRT-PCR、Westernblot結果表明miR-519抑制MMP-2mRNA和蛋白水平表達(P<0.05)。